EFICIÊNCIA DOS METABÓLITOS DE Pseudomonas fluorescens NA REDUÇÃO DA COLÔNIA DOS PATÓGENOS DO ARROZ

Abstract

A cultura do arroz (Oryza sativa) é ameaçada por fatores que tendem a limitar a sua produção. A brusone (Magnaporthe oryzae) é a principal doença do arroz causando perdas de até 100% da produção. A rizobactéria Pseudomonas fluorescens vem se destacando como agente biológico, antifúngico, indutor de resistência e promotor de crescimento que afetam beneficamente a produtividade do arroz. Este trabalho teve por objetivo verificar a eficiência de metabólitos de Pseudomonas fluorescens (BRM 32111), em diferentes concentrações, na redução micelial de M. oryzae. Avaliou-se a partir das bactérias benéficas da coleção da embrapa arroz e feijão a eficiência na formação de biofilme e solubilização de fosfato. Foram realizados 3 testes com 4 repetições para verificar a natureza antagônica da rizobactéria P. fluorescens contra o patógeno M. oryzae. No primeiro teste, com a bactéria in natura, foi realizado pareamento com um disco do patógeno envolto por umo cultivo quadrangular e em forma de linha com a rizobactéria ajustada a absorbância de 0,500abs. Posteriormente, foram realizadas as extrações dos metabólitos submetidos a diferentes horários de crescimento em caldo nutriente,com 6, 16, 24, 48, 72 e 96 horas, nos quais foram devidamente centrifugados e filtrados por filtro de membrana de 22 e 45nm. Foram realizados duas metodologias distintas para análise de eficiência do mesmo, sob diferentes concentrações e pareados com o patógeno M. oryzae avaliando a área da colônia do patógeno sete dias após incubação comdicionados a temperatura controlada e luz branca. Para teste com os filtrados, na metodologia 1, em placa de Petri contendo meio de cultura BDA, foram realizados quatro poços em volta do patógeno situado no centro da placa onde foram aliquotados as diferentes concentrações de metabólitos (0, 20, 50, 100, 150 e 200μl), distribuidas por igual entre os poços. Na metodologia 2, diferentes concentrações de metabólitos extraidos em diferentes horários, foram incorporados no meio de cultura BDA, uma placa contendo metabólito incorporado e outra contendo o patógeno foram sobrepostas, vedadas e incubadas para verificação da ação dos voláteis. Todas as bactérias apresentaram eficiência na solubilização de fosfato e somente a P. fluorescens na formação de biofilme. No pareamento com a bactéria in natura, observou-se que todos os tratamentos se diferiram estatisticamente do controle exceto no teste de voláteis, no qual não apresentou diferença. No teste com os filtrados, na metodologia 1, os metabólitos extraídos em 16 horas apresentaram diferença significativa bastante expressiva, seguido pelos tratamentos de 48, 24 e 6 horas apresentando menores médias comparados ao controle. No pareamento através de voláteis, metodologia 2, o tratamento de 72 horas, apresentou melhor resultado na redução da área da colônia de M.oryzae em relação ao controle ao comparar as médias. Portanto, concluie que, a extração de metabólitos de P. fluorescens é mediado por 16 a 48 horas a partir do crescimento inicial de células, sendo um agente promissor no controle biológico de doenças. Este trabalho proporcionou uma base metodológica para extração de metabólitos bacterianos de P. fluorescens com grande viabilidade e eficiência.